核酸蛋白檢測儀應用及方法

核酸蛋白檢測儀應用及方法

核酸蛋白檢測儀

核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置，核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統（根據需要選配）和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學(xué)研究、藥物測定、化工、食品科學(xué)及醫學(xué)研究等行業(yè)的現代分析實(shí)驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于工業(yè)、農業(yè)、科研和大專(zhuān)院校的科學(xué)研究和教學(xué)實(shí)驗。

核酸蛋白檢測儀其原理是根據物質(zhì)（樣品）對紫外光有明顯吸收的特征，實(shí)現對樣品成份含量比對分析，以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識別檢測和含量測定。在生化分析、環(huán)?？茖W(xué)、食品研究、毒理研究、新藥開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域中對核酸、蛋白檢測、純化和提取提供了一種的分析手段。

紫外分析儀

紫外檢測原理基于被測組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同，當被檢測組分通過(guò)檢測窗時(shí)，吸光度發(fā)生變化服從朗伯-比爾定律，即在一定的實(shí)驗條件下，吸光度與被測組分的濃度成正比。

紫外分析儀用于核酸蛋白檢測

紫外-可見(jiàn)光分光光度計在生物科技中可用于測定核酸和蛋白質(zhì)的濃度。

首先，核酸的基本結構單位是核苷酸。核苷酸由一個(gè)含氮堿基（嘌呤或嘧啶），一個(gè)戊糖（核糖或脫氧核糖）和一個(gè)或幾個(gè)磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵，因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近，可用于測定核酸。根據260nm與280nm的吸收光度（A260）可判斷核酸純度。

再談蛋白質(zhì)，構成它的組成是氨基酸，其中的種類(lèi)包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸，這幾種芳香族氨基酸的苯環(huán)含有共軛雙鍵，使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值）與蛋白質(zhì)含量成正比。所以，紫外吸收法是280 nm 的光吸收法，含有核酸的蛋白質(zhì)溶液使用280 和260 nm 的吸收差法較好。蛋白質(zhì)的稀溶液采用215 與225 nm 的吸收差法。

此外，蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長(cháng)下，蛋白質(zhì)溶液的光吸收值與蛋白質(zhì)濃度的正比關(guān)系，可以進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測定。紫外吸收法簡(jiǎn)便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定后仍能回收使用。

還有一些測定蛋白質(zhì)的方法，是通過(guò)蛋白質(zhì)與一些物質(zhì)的作用產(chǎn)生顏色，然后在此有色光光譜內測定吸光度。將已知濃度的蛋白質(zhì)溶液稀釋幾個(gè)倍數，與物質(zhì)作用后作為標準品，測定吸光度做出一條曲線(xiàn)，然后未知溶液的濃度就可通過(guò)吸光度來(lái)得出。這些方法包括，凱氏定氮法，考馬斯亮藍法（Bradford），Folin-酚試劑法（Lowry法）和BCA法。