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核酸蛋白檢測儀應用及方法

核酸蛋白檢測儀應用及方法

 


核酸蛋白檢測儀

核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學(xué)研究、藥物測定、化工、食品科學(xué)及醫學(xué)研究等行業(yè)的現代分析實(shí)驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于工業(yè)、農業(yè)、科研和大專(zhuān)院校的科學(xué)研究和教學(xué)實(shí)驗。

 

核酸蛋白檢測儀其原理是根據物質(zhì)(樣品)對紫外光有明顯吸收的特征,實(shí)現對樣品成份含量比對分析,以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識別檢測和含量測定。在生化分析、環(huán)??茖W(xué)、食品研究、毒理研究、新藥開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域中對核酸、蛋白檢測、純化和提取提供了一種的分析手段。

 

紫外分析儀

紫外檢測原理基于被測組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同,當被檢測組分通過(guò)檢測窗時(shí),吸光度發(fā)生變化服從朗伯-比爾定律,即在一定的實(shí)驗條件下,吸光度與被測組分的濃度成正比。

 

紫外分析儀用于核酸蛋白檢測

紫外-可見(jiàn)光分光光度計在生物科技中可用于測定核酸和蛋白質(zhì)的濃度。

首先,核酸的基本結構單位是核苷酸。核苷酸由一個(gè)含氮堿基(嘌呤或嘧啶),一個(gè)戊糖(核糖或脫氧核糖)和一個(gè)或幾個(gè)磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵,因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于測定核酸。根據260nm與280nm的吸收光度(A260)可判斷核酸純度。

 

再談蛋白質(zhì),構成它的組成是氨基酸,其中的種類(lèi)包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸,這幾種芳香族氨基酸的苯環(huán)含有共軛雙鍵,使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處,其吸光度(即光密度值)與蛋白質(zhì)含量成正比。所以,紫外吸收法是280 nm 的光吸收法,含有核酸的蛋白質(zhì)溶液使用280 和260 nm 的吸收差法較好。蛋白質(zhì)的稀溶液采用215 與225 nm 的吸收差法。

 

此外,蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長(cháng)下,蛋白質(zhì)溶液的光吸收值與蛋白質(zhì)濃度的正比關(guān)系,可以進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測定。紫外吸收法簡(jiǎn)便、靈敏、快速,不消耗樣品,測定后仍能回收使用。

 

還有一些測定蛋白質(zhì)的方法,是通過(guò)蛋白質(zhì)與一些物質(zhì)的作用產(chǎn)生顏色,然后在此有色光光譜內測定吸光度。將已知濃度的蛋白質(zhì)溶液稀釋幾個(gè)倍數,與物質(zhì)作用后作為標準品,測定吸光度做出一條曲線(xiàn),然后未知溶液的濃度就可通過(guò)吸光度來(lái)得出。這些方法包括,凱氏定氮法,考馬斯亮藍法(Bradford),Folin-酚試劑法(Lowry法)和BCA法。


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